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絕大多數(shù)貼壁Vero細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)都是使用微載體技術(shù)在攪拌式細(xì)胞生物反應(yīng)器中進(jìn)行的。在這里,細(xì)胞附著在微載體上,微載體被設(shè)計(jì)成在攪拌培養(yǎng)中保持懸浮。微載體的種類很多,主要分為固體和大孔兩種,表面性質(zhì)不同。幾項(xiàng)研究比較了不同類型的微載體用于Vero細(xì)胞的繁殖.目前多數(shù)使用Cytodex1微載體.Cytodex1微載體是基于葡聚糖的固體微載體,顯示帶電表面,平均直徑為180μm左右。近年來(lái),國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的DISKS片狀載體孔徑只有15μm,單層厚度約0.44mm,可以維持較好的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)...
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單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對(duì)某一特定抗原表位的抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來(lái)制備,雜交瘤(hybridoma)抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上,將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細(xì)胞和具有無(wú)限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為B細(xì)胞雜交瘤。1975年分子生物學(xué)家G.J.F.克勒和C.米爾斯坦在自然雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上,創(chuàng)建立雜交瘤技術(shù),他們把可在體外培養(yǎng)和大量增殖的小鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)抗原免疫后的純系小鼠B細(xì)胞融合,成為雜交細(xì)胞系,既具有瘤細(xì)胞易于在體外無(wú)限增殖的特性,又具...
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抗體,又名免疫球蛋白(Ig),是一種由B細(xì)胞產(chǎn)生的大型Y形糖蛋白,可在免疫防御中起主要作用??贵w與病原體的特定分子(即抗原)發(fā)生特異性結(jié)合??贵w以一個(gè)或者多個(gè)Y形單體存在,每個(gè)Y形單體由4條多肽鏈組成。每個(gè)Y形單體包含兩條相同的重鏈(H)和兩條相同的輕鏈(L),重鏈和輕鏈的序列和長(zhǎng)度不同。Y形單體的頂部包含可變區(qū)(V),也稱抗原結(jié)合片段(F(ab))區(qū)。該區(qū)可與給定抗原上的表位特異性緊密結(jié)合??贵w的基本結(jié)構(gòu)包含恒定區(qū)(C)和可結(jié)晶片段(Fc)區(qū)。這一區(qū)域?qū)贵w的免疫應(yīng)答功能非...
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近年來(lái),隨著對(duì)蛋白酶K研究的深入,該酶的應(yīng)用范圍不僅在醫(yī)療診斷及科研領(lǐng)域得到了十分廣泛的應(yīng)用,該酶還作為替代其它作用范圍較窄的蛋白酶,主要應(yīng)用于造紙、工業(yè)制革、飼料生產(chǎn)、食品加工等行業(yè)中。此外,該酶還可以替代傳統(tǒng)的通過(guò)化學(xué)方法處理原材料的方法,減少污染。在各行各業(yè)中,蛋白酶K的主要用途有:①在分離DNA和RNA的過(guò)程中,用于核酸酶的蛋白水解失活。蛋白酶K能降解與核酸結(jié)合的蛋白質(zhì),促進(jìn)蛋白與核酸的分離,因此該酶在提取高分子量的核酸時(shí)具有很大的優(yōu)勢(shì)。蛋白酶K還常被用于RNA提取過(guò)...
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蛋白酶K(ProteinaseK)是一種廣譜絲氨酸蛋白酶,蛋白酶K于1974年在fungusEngyodontiumalbum的提取物中發(fā)現(xiàn)。能合成該種蛋白酶的微生物能在以角蛋白(Keratin)作為碳源和氮源的環(huán)境中生長(zhǎng),說(shuō)明該酶可以消化角蛋白,因此被稱為“蛋白酶K”。蛋白酶K由一條肽鏈組成,含有277個(gè)氨基酸,該蛋白的相對(duì)分子量~28.9kDa,蛋白酶K是一種穩(wěn)定且具有高活性的絲氨酸蛋白酶。晶體和分子結(jié)構(gòu)研究證據(jù)表明該酶屬于枯草素家族,具有活性位點(diǎn)催化三聯(lián)體(Asp39-...
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