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層析工藝放大需要遵循的原則

層析工藝放大原則包括線性放大原則和固定保留時(shí)間原則。線性放大原則線性放大原則是工藝放大過程中常用的原則，其核心思路是保持層析柱柱高和線性流速不變，只放大層析柱直徑和體積流速。固定的柱高和線性流速理論上可以保證相同的保留時(shí)間、層析中溶液用到的CV數(shù)和洗脫樣品CV數(shù)，較大程度保證相同的純化效果。線性放大原則的具體操作方法可參見下表：層析工藝在實(shí)際的應(yīng)用過程中，線性放大可能會(huì)遇到幾個(gè)問題，一是層析設(shè)備供應(yīng)商提供的層析柱都是幾個(gè)固定規(guī)格，可能無法適配具體某項(xiàng)的工藝需求；二是當(dāng)層析柱直...

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熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中PCR儀器選購(gòu)技巧

聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)是無數(shù)研究和測(cè)試實(shí)驗(yàn)室的主要技術(shù)，涉及的領(lǐng)域包括生物醫(yī)學(xué)、基因編輯、食品微生物學(xué)測(cè)試等。熒光定量PCR技術(shù)使用熱循環(huán)來促進(jìn)一系列反應(yīng)，在這些反應(yīng)中，DNA樣本會(huì)快速、呈指數(shù)地復(fù)制，從而產(chǎn)生數(shù)百萬或數(shù)十億個(gè)序列拷貝。購(gòu)買PCR儀器時(shí)，重要的是要考慮您的應(yīng)用的最終目標(biāo)、熱循環(huán)設(shè)備的準(zhǔn)確性和效率以及儀器的容量和靈活性。本文概述了PCR儀器可用的不同選項(xiàng)和功能，以幫助您選購(gòu)合適的PCR儀。1.PCR與qPCR與dPCR雖然所有PCR系統(tǒng)都使用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)復(fù)...

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應(yīng)用差速離心法分離外泌體的原理

外泌體是一種小的(40-100nm)細(xì)胞外膜囊泡，目前進(jìn)行外泌體分離的普遍方法是差速離心法。應(yīng)用差速離心法和粒徑分析等是細(xì)胞外囊泡(EV)研究的重要步驟。已知細(xì)胞會(huì)分泌許多膜囊泡，這些囊泡的大小、分子含量及其形成機(jī)制各不相同具體取決于細(xì)胞的類型和當(dāng)前狀態(tài)。通?？梢员鎰e出三個(gè)主要的EV群體：凋亡小體、脫落的囊泡和外泌體.凋亡小體是已知較大的囊泡，直徑為800-5000nm，由凋亡后細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)和質(zhì)膜成分組成。脫落的囊泡和外泌體由非凋亡細(xì)胞釋放。脫落的囊泡，也稱為“胞外體”或有時(shí)...

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影響細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境因素有哪些

細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境主要通過CO2培養(yǎng)箱、震蕩培養(yǎng)箱（即溫度、濕度、O2和CO2張力）和基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基及其補(bǔ)充劑來實(shí)現(xiàn)。這不僅包括碳水化合物、維生素、氨基酸、礦物質(zhì)、生長(zhǎng)因子、激素等營(yíng)養(yǎng)素的供應(yīng)，還包括控制培養(yǎng)物pH值和細(xì)胞滲透壓等理化特性的成分。此外，固體或半固體生長(zhǎng)基質(zhì)和細(xì)胞密度分別允許細(xì)胞-基質(zhì)錨定和細(xì)胞-細(xì)胞相互作用，這進(jìn)一步控制了生理相關(guān)微環(huán)境的模擬。為滿足特定細(xì)胞類型的要求，市場(chǎng)上已有多種細(xì)胞培養(yǎng)基組合物，并且可以根據(jù)它們補(bǔ)充血清的水平進(jìn)行分類。胎牛血清(FBS)形式的血...

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外泌體制造需要哪些實(shí)驗(yàn)室設(shè)備

外泌體是蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸的天然載體，在細(xì)胞間通訊中起著至關(guān)重要的作用。外泌體包含各種膜蛋白，例如內(nèi)體相關(guān)蛋白（Alix、Tsg101和Rab蛋白）、四跨膜蛋白（CD63、CD81、CD82、CD53和CD37）和脂筏相關(guān)蛋白（糖基磷脂酰肌醇和flotillin）。隨著近年來生物技術(shù)、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的不斷發(fā)展，外泌體有著廣泛的應(yīng)用前景，包括藥物發(fā)現(xiàn)、配體篩選和靶向藥物遞送。進(jìn)而即用型、高質(zhì)量的功能性外泌體的需求也越來越顯明，這種工業(yè)外泌體生產(chǎn)需要通過大規(guī)模外泌體制備和純化來實(shí)現(xiàn)。...

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